磁珠法微量DNA胶回收试剂盒

产品货号：

GS0104

中文名称：

磁珠法微量DNA胶回收试剂盒

英文名称：

QuMag Gel Micro DNA Purification Kit

产品规格：

50次|100次

发货周期：

1～3天

产品价格：

询价

本试剂盒专用于从TAE和TBE琼脂糖凝胶中回收微量的DNA片段，可以回收低至25ng的DNA片段；回收片段范围广，可以回收100bp～30kb的DNA片段，回收效率可达70%，且回收效率受回收片段大小的影响比较小。与市售的微量DNA胶回收试剂盒相比，本试剂盒最大特点是用QuMag Beads代替硅胶膜吸附柱，QuMag Beads能够特异性吸附微量的DNA，具有吸附效率高，吸附速度快等优势。采用本试剂盒所得到的DNA可直接用于酶切、连接、测序等后续的分子生物学实验。

适用微量PCR产物的胶回收，可以回收到低至25ng DNA片段。
QuMag beads代替硅胶膜吸附柱，吸附效率高，吸附速度快。
适用范围广，回收效率高，适用100bp～30kb的DNA片段，且回收效率达70%。
操作简单快速，整个回收过程仅须30min左右。
无需离心，可以实现微量DNA胶回收的高通量化和自动化。

组分	50次	100次
Buffer MB2	30mL	60mL
QuMag Beads	3.75mL	7.5mL
TE Buffer(pH8.0)	2.5mL	5mL

保存：室温

自备材料：磁力架、水浴锅、1.5mL离心管和70%乙醇。
Buffer MB2在低温下可能产生沉淀，使用前请检查，如有沉淀，请于37℃溶解沉淀，待冷却至室温后使用。
请提前将水浴锅调至65℃备用。

通过琼脂糖凝胶电泳尽可能将目的DNA片段与其它片段分开，用干净的手术刀片将含目的DNA片段的琼脂糖凝胶块切下，放入1.5mL离心管中，称重。
- 尽可能多地去掉不含目标DNA的琼脂糖。
- 切胶过程尽可能快，减少DNA在紫外线中的暴露时间以降低对DNA的损伤。
根据胶块的重量，胶浓度<2%，按每100mg琼脂糖胶块（如胶块不足100mg则用水补充至100mg)加入200μL Buffer MB2；若胶浓度≥2%，按每100mg琼脂糖胶块（若胶块不足100mg则用水补充至100mg)加入300μL Buffer MB2。
将含有胶块的离心管置于65℃水浴10min，间或混匀，直至胶块完全溶化。
- 胶块完全溶化即可，过长时间的处理可能导致DNA损伤。
取出离心管，加入75μL QuMag Beads，吸打或者点振混匀，室温静置3～5min，间或混匀。
- 加QuMag Beads之前，请将QuMag Beads充分混匀。
- 请务必将QuMag Beads加至液面以下，尽量将枪头上残留QuMag Beads吸打干净。
将离心管置于磁力架上3min，待QuMag Beads完全吸至管壁上之后，吸弃上清，从磁力架上取出离心管。
- 吸弃上清前，若管口粘有少量QuMag Beads，请用上清液将其洗至离心管内，以确保所有QuMag Beads吸附至管壁上。
- 吸弃上清时请勿吸入QuMag Beads，尽量吸净上清。
- 从磁力架上取出离心管后，若有少量上清，请将离心管置于磁力架上，再次吸取上清。
加入700μL 70%乙醇，吸打或者点振混匀，然后将离心管置于磁力架上1min，待QuMag Beads完全吸至管壁上之后，吸弃上清，从磁力架上取出离心管。
- 吸弃上清前，若管口粘有少量QuMag Beads，请用上清液将其洗至离心管内，以确保所有QuMag Beads吸附至管壁上。
- 吸弃上清时，请勿吸入QuMag Beads，尽量吸净上清。
重复步骤6一次，室温开盖干燥15min或者55℃恒温箱中开盖干燥5min至管内无液体残留。
- 干燥前，请尽量吸净管内的液体。
- 干燥前，若出现液体挂壁现象，可将离心管短暂离心之后，再将其置于磁力架上，待所有QuMag Beads完全吸至管壁之后再吸净管内的液体。
加入15μL TE Buffer (pH8.0)，室温放置5min，间或混匀。
- 请将管壁上所有QuMag Beads完全悬浮在TE Buffer中。
- 若增加产量，可以65℃水浴5min，间或混匀。
- 根据实验需要可将TE Buffer用无菌的双蒸水(pH>7.5)代替。
取出离心管并置于磁力架上1min，待QuMag Beads完全吸至管壁上之后，小心吸取上清至新的离心管，即获得回收的目的DNA。
- 吸取上清前，请确保QuMag Beads完全吸至管壁，请勿吸入QuMag Beads，否则影响产物纯度。
- 若洗脱步骤采用水浴，可以短暂离心之后再取上清。

DNA回收效率较低或者未回收到目的片段
- 胶块溶解不完全。可适当延长水浴时间，并增加颠倒混匀的频率辅助溶解。
- 结合不充分。加入QuMag Beads之后，请将其充分混匀，并使QuMag Beads处千完全悬浮状态。
- 操作过程中丢失QuMag Beads。结合及洗涤过程中可能有少量的QuMag Beads粘在离心管管口上，吸弃上清前请用少量的上清液清洗管口，使粘在管口的QuMag Beads也吸附在管壁上。
- 洗脱液不合适。洗脱缓冲液的pH值对洗脱效率有影响，如果使用水进行洗脱，请确保其pH值>7.5,pH值过低可能导致低洗脱效率。
- 洗脱过程操作不当。洗脱时请将管壁上所有QuMag Beads充分悬浮在TE Buffer中。
- 洗脱时间太短。加入TE Buffer之后请充分悬浮QuMag Beads，然后室温放置5min，间或混匀。
回收DNA进行后续酶切反应效率低
- 乙醇有残留。请吸弃上清之后从磁力架上取出离心管，放置2min之后再将离心管置于磁力架上1min，吸净管底的液体。若出现残液挂壁现象，请短暂离心之后将离心管置于磁力架上1min，吸净离心管内的液体。
- QuMag Beads洗涤不充分。向离心管中加入70%乙醇之后，请充分混匀，使QuMag Beads充分悬浮在70%乙醇中。
- QuMag Beads没有完全干燥。请将QuMag Beads完全干燥，保证无乙醇残留。
- 最一后步吸取上清时吸入QuMag Beads。请确保所有QuMag Beads吸至管壁上，再吸取上清。如果不小心吸入QuMag Beads，请将上清液放回原管，待QuMag Beads完全吸至管壁之后重新吸取上清。或者将吸取的上清DNA溶液10000rpm离心2min，再取上清。
- 琼脂糖质量差。请选用高质量的琼脂糖。
琼脂糖凝胶胶块不溶
- 琼脂糖质量差。请选用高质量的琼脂糖。
- 含目的片段的胶块在空气中放置时间过长，使胶块失水、干燥。建议切胶后立即进行胶回收，或将胶块保存在4℃或-20℃备用。
- 配制琼脂糖凝胶的电泳缓冲液浓度过高或陈旧。应重新配制缓冲液。
洗脱液的选择
- 洗脱液可以根据后续实验的需要来确定。一般情况下，若需要进行测序反应，请用双蒸水洗脱。如果需要长期保存DNA，请用TE Buffer洗脱。
相关搜索：磁珠法微量DNA胶回收试剂盒，凝胶DNA回收试剂盒，QuMag Gel Micro DNA Purification Kit

产品目录